細胞復(fù)蘇，生物學(xué)的一種術(shù)語，是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng)，細胞恢復(fù)生長的過程。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。

　　細胞復(fù)蘇的步驟：

　?、賹⒗鋬龉軓囊旱腥〕?，迅速投入37℃水浴融化，細胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時間延長會提高細胞死亡率，復(fù)蘇過程中一般細胞死亡率在20%～25%之間。

　?、谘杆儆镁凭耷虿潦美鋬龉芡獠繗⒕?，然后放置在冰浴上。

　　③小心開啟瓶蓋，把細胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱，26℃～28℃培養(yǎng)1h，讓細胞貼壁。

　　④細胞貼壁后，小心移棄培養(yǎng)基，主要是去掉DMSO(懸浮生長細胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細胞及其碎片，加5mL新鮮培養(yǎng)基，26℃～28℃培養(yǎng)。

　　⑤細胞培養(yǎng)24h后，更換新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)直到形成單層，便可以傳代。

　?、拊敿氂涗洀?fù)蘇細胞的名稱、數(shù)量、復(fù)蘇時間、存放部位等。

　　細胞復(fù)蘇的注意事項：

　　1、注意無菌操作。

　　2、應(yīng)在1-2min內(nèi)使凍存液融化。如果復(fù)溫速度太慢，則會造成細胞損傷。另外，細胞復(fù)蘇后的操作-好在4℃冰浴中進行，以減少冷凍保護劑對細胞的毒性。

　　3、細胞復(fù)蘇過程中，升溫的速率要大，把從液氮或-70℃冰箱中取出的細胞在短的時間內(nèi)放入水浴鍋。

　　4、細胞放入水浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，并防止水浴時水進入細胞凍存管污染細胞。打開細胞凍存管之前要用酒精棉球?qū)龃婀芟静⒘栏伞?/div>